Статья:

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМАТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ПРОТИВОПАРАЗИТАРНЫХ СРЕДСТВ

Конференция: VI Студенческая международная заочная научно-практическая конференция «Молодежный научный форум: естественные и медицинские науки»

Секция: 5. Сельскохозяйственные науки

Выходные данные
Ельцова А.А. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМАТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ПРОТИВОПАРАЗИТАРНЫХ СРЕДСТВ // Молодежный научный форум: Естественные и медицинские науки: электр. сб. ст. по мат. VI междунар. студ. науч.-практ. конф. № 6(6). URL: https://nauchforum.ru/archive/MNF_nature/6(6).pdf (дата обращения: 20.08.2018)
Лауреаты определены. Конференция завершена
Эта статья набрала 188 голосов
Мне нравится
Дипломы
лауреатов
Сертификаты
участников
Дипломы
лауреатов
Сертификаты
участников
на печатьскачать .pdfподелиться

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМАТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ПРОТИВОПАРАЗИТАРНЫХ СРЕДСТВ

Ельцова Алёна Анатольевна
студент Омского государственного аграрного университета им. П.А. Столыпина, РФ, г. Омск
Бойко Татьяна Владимировна
научный руководитель, научный руководитель, доцент Омского государственного аграрного университета им. П.А. Столыпина, РФ, г. Омск

 

 

 

Актуальность исследования. Паразитарные болезни широко распространены в популяции животных и наносят большой экономический ущерб, при этом многие из них представляют серьезную угрозу и для здоровья человека. В связи с этим применение высокоэффективных и безопасных противопаразитарных средств является обязательным условием для осуществления контроля численности эндо- и эктопаразитов животных на всех фазах их развития.

В настоящее время на фармацевтическом рынке Российской Федерации ассортимент противопаразитарных средств для животных представлен более 230 препаратами с различными механизмами действия [5]. Однако, проблема резистентности паразитов к лекарственным препаратам, диктует необходимость в создании новых «уникальных» средств, отличающихся от предыдущих классов иными механизмами действия. Одним из «простых» способов решения данной проблемы является создание комбинированных препаратов из уже известных действующих веществ. Представителями таких противопаразитарных лекарств для животных являются препараты Адвокат® (10 % имидаклоприд +2,5 % моксидектин, Байер КропСайенс АГ, Германия) и Инспектор Тотал К® (10 % фипронил + 1 % моксидектин, разработан НПФ «Экопром» под контролем лаборатории Veterinary Bio UG (Германия)). Комбинированные средства отличаются от монопрепаратов более широким спектром паразитоцидного действия. Они активны в отношении демодекозных (Demodex canis) и саркоптоидных (Sarcoptes canis, Otodectes cynotis) клещей, блох (Stenocephalides canis), вшей (Linognatus setotus), власоедов (Trichodectes canis), личиночных и половозрелых фаз развития кишечных нематод, включая Toxocara canis, Toxascaris leonina, Ancylostoma caninum, Ancylostoma tubaeforme, Uncinaria stenocephala, Trichuris vulpis и личиночных форм Dirofilaria immitis.

По степени воздействия на организм Адвокат® и Инспектор Тотал К® относят к умеренно опасным веществам. В рекомендуемых дозах препараты не оказывают местно-раздражающего, эмбриотоксического, тератогенного, мутагенного и иммунотоксического действия, хорошо «переносятся» животными.

Наряду с высокой эффективностью противопаразитарных средств на целевые объекты, при нарушении дозовых режимов их применения возможно проявление токсических эффектов для макроорганизма [1; 2]. Одной из первых систем в организме на введение ксенобиотиков реагирует система крови, при этом изменения клеточного состава и биохимических показателей крови позволяют оценить вектор токсических проявлений с целью разработки в дальнейшем мер профилактики и/или фармакокоррекции возможных осложнений.

Цель работы — изучить гематотоксическое действие противопаразитарных средств Адвокат® и Инспектор Тотал К®.

Материалы и методы. Эксперименты проводили на половозрелых нелинейных белых крысах самцах с массой тела 230—250 г, подобранных по принципу аналогов. При работе с экспериментальными животными руководствовались «Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, которые используются в экспериментальных и других научных целях (Страсбург, 18.03.1986). Пестицидные препараты Адвокат® (1-ая опытная группа, n=5) и Инспектор Тотал К® (2-ая опытная группа, n=5) наносили крысам на холку однократно в утренние часы в дозе 100 мг/кг (доза в 10 раз выше терапевтической) однократно. Кровь из хвостовой вены исследовали через четверо суток после нанесения препаратов. Контролем служили интактные животные, которым на область холки наносили растительное масло в том же объеме (группа сравнения, n=5). Количество лейкоцитов подсчитывали в камере Горяева [6]. Мазки крови после высушивания фиксировали этиловым спиртом и окрашивали по Романовскому-Гимза в течение 40 минут. Подсчитывали 200 клеток в разных полях зрения и выводили лейкограммы. Активность миелопероксидазы оценивали с помощью цитохимического метода Грехема-Кноля с использованием в качестве субстрата перекиси водорода и бензидина (в присутствии миелопероксидазы бензидин окисляется перекисью водорода в коричневый оксибензидин), с последующим докрашиванием мазков по Романовскому. Активность миелопероксидазы выражали в крестах по 5-ти бальной шкале [6]. Исследования биохимических показателей проведены на биохимическом анализаторе “Screen Master” производства фирмы “Hospitex” (Швейцария, Италия) с использованием реактивов “Hospitex” (Швейцария, Италия).

Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью пакета прикладных статистических программ STATISTICA 6.0. с использованием непараметрического критерия Mann-Whitney. Различия считали значимыми при р<0,05. Микрофотосъемку осуществляли на микроскопе Альтами БИО 1Т с цифровой окулярной камерой UCMOS0300KPA.

Результаты исследования. На протяжении всего периода наблюдений гибели эксперементальных животных не отмечали. Первые клинические признаки интоксикации появились через 15 минут после нанесения препаратов на кожу. Сначала у животных опытных групп отмечали легкое угнетение, сонливость. Далее нарастала мышечная слабость, животные постепенно погружались в сон, который продолжался несколько часов. У животных второй опытной группы периодически наблюдали явление вокализации. Через сутки поведение крыс опытных групп соответствовало физиологической норме. У животных в течение всего экспериментального периода наблюдали сохранение аппетита.

При анализе морфологических показателей крови крыс обеих опытных групп отмечали повышение количества лейкоцитов на 69 % (Рm-u =0,009) и 52 % (Рm-u=0,009) соответственно, что свидетельствует об усилении лейкопоэза и является ответной защитно-приспособительной реакцией организма [3]. При анализе гранулоцитарного ростка кроветворения у крыс обеих опытных групп регистрировали увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов в 1,6 (Рm-u=0,036) и 2 раза (Рm-u=0,009) и эозинофилов — в 5 (Рm-u=0,009) и 8 раз (Рm-u=0,009) соответственно на фоне относительной лимфопении. Регенеративный сдвиг влево свидетельствует о высокой реактивности лейкопоэтической системы, участвующей в процессах детоксикации организма. Количество моноцитов возрастало на 80 % (Рm-u =0,012) в крови крыс, обработанных Инспектором Тотал К® по сравнению с показателем контрольной  группы. В обеих группах наблюдали рост числа клеток Гумпрехта (в 4 и 7 раз по сравнению с группой контроля), что свидетельствует об изменении химических свойств крови и функциональных возможностей мембран клеток, которые становятся менее стойкими [4].

Результаты биохимических показателей сыворотки крови крыс, обработанных Адвокатом® и Инспектором Тотал К® в дозе 100 мг/кг массы, представленные в таблице 1, свидетельствуют о более высокой токсичности Инспектора Тотал К®. Уровень общего белка в сыворотке крови этой группы животных повысился на 14 % (Рm-u˂0,009); концентрация альбуминов возросла на 33 % (Рm-u˂0,009); глобулинов — на 6 % (Рm-u˂0,009); уровень мочевины увеличился на 48 % (Рm-u˂0,009), а креатинина — на 10 %; концентрация глюкозы повысилась на 64 % (Рm-u˂0,009). В сыворотке крови крыс, 1-ой опытной группы регистрировали достоверное повышение только количества альбуминов на 12 % (Рm-u˂0,009), остальные показатели не имели достоверных отличий от показателей контрольной группы животных.

Таблица 1

Биохимические показатели сыворотки крови крыс при обработке противопаразитарными препаратами Адвокат® и Инспектор Тотал К® в дозе 100 мг/кг


Показатели


Контроль, n=5


1-ая опытная, n=5


2-ая опытная, n=5


Общий белок,

г/л


М±m


66,3(65,9;66,8)


70,36(69,3;72,2)


75,5(74,9;76,2)


Рm-u


 


0,075


0,009


Глобулины,

г/л


М±m


41,7(41,5;42,1)


42,4(40,9;44,7)


44,0(43,7;44,1)


Рm-u


 


0,530


0,009


Альбумин,

г/л


М±m


24,4(24,3;25,1)


27,3(26,7;27,9)


31,9(31,5;32,4)


Рm-u


 


0,009


0,009


Глюкоза,

ммоль/л


М±m


4,2(4,0;4,2)


4,3(3,9;4,7)


6,9(6,6;7,1)


Рm-u


 


0,834


0,009


Лактат, ммоль/л


М±m


4,4(4,2;4,8)


4,2(3,9; 4,5)


4,8(4,1;4,7)


Рm-u


 


0,250


0,916


Мочевина,

ммоль/л


М±m


4,0(3,9;4,2)


5,2(3,9;6,5)


5,9(5,5;6,2)


Рm-u


 


0,403


0,009


Креатинин,

мкмоль/л


М±m


57,7(57,5;58,3)


56,8 (55,2;58,5)


63,4(59,9;66,1)


Рm-u


 


0,530


0,009

 

Миелопероксидаза как показатель активности нейтрофилов служит маркером интенсивности воспалительных процессов в организме. Результаты исследований свидетельствуют о достоверном повышении активности фермента при перкутанной обработке Адвокатом® и Инспектором Тотал К® в дозе 100 мг/кг массы через 4 суток после нанесения (табл. 2, рис. 1,2).

Таблица 2

Активность миелопероксидазы гранулоцитов при обработке противопаразитарными препаратами Адвокат® и Инспектор Тотал К® в дозе 100 мг/кг


Группы


Активность МПО


-


+


++


+++


++++


Контроль


М±m


62,0

(56,0;66,0)


26,4

(21,0;30,0)


8,2

(8,0;10,0)


4,2

(4,0;5,0)


4,2

(4,0;5,0)


Рm-u<0,05







Адвокат


М±m


2,8

(2,0;4,0)


19,8

(19,0;21,0)


30,4

(27,0;33,0)


27,2

(26,0;30,0)


19,8

(18,0;21,0)


Рm-u<0,05


0,009


0,117


0,009


0,009


0,009


Инспектор Тотал К®


М±m


2,8

(2,0;3,0)


17,4

(10,0;21,0)


31,0

(28,0;35,0)


23,0

(22,0;24,0)


25,8

(21,0;30,0)


Рm-u<0,05


0,009


0,143


0,009


0,009


0,009

 

Рисунок 1. Отсутствие миелопероксидазы. Контроль. Окраска водным раствором бензидина, с докрашиванием по Романовскому. Ув.×1000.

 

Рисунок 2. Активность миелопероксидазы ++++. Опыт 2. Окраска водным раствором бензидина, с докрашиванием по Романовскому. Ув.×1000.

 

Выводы:

1.  Противопаразитарные препараты Адвокат® и Инспектор тоталК® при однократной накожной обработке крыс в дозе 100 мг/кг вызывают относительную эозинофилию на фоне лейкоцитоза и повышение активности миелопероксидазы.

2.  Повышение уровня мочевины и креатинина на фоне диспротеинемии при обработке крыс Инспектором ТоталК® свидетельствуют о гепато- и нефротоксическом действии препарата.

3.  Более выраженным общетоксическим действием обладает Инспектор ТоталК®, что необходимо учитывать при назначении препарата животным с патологией печени и почек.

 

Список литературы:

1.      Вовк А.А. Клинические проявления и изменение естественной резистентности у крыс под действием токсической дозы противопаразитарного препарата Аверсект-2 / А.А. Вовк // Актуальные вопросы ветеринарной медицины Сибири: материалы междунар. науч.-практ.конф. — Краснообск, 2010. — С. 298—303.

2.    Вовк А.А. Особенности лейкоцитарной реакции у крыс при введении терапевтической дозы Аверсекта-2 / А.А. Вовк // Материалы III съезда фармакологов и токсикологов России: сб.науч.тр. студенческой конф. — Барнаул, 2011. — С. 202—203.

3.       Гаркави Л.Х. Антистрессорные реакции и активационная терапия [Электронный ресурс] / Л.Х. Гаркави, Е.Б. Квакина, Т.С. Кузьменко. — Режим доступа: http://lib.convdocs.org/docs/ index-31433.html.

4.  Герунов Т.В. Изменения в переферической крови у крыс при эксперементальной интоксикации циперметрином / Т.В. Герунов // Современные проблемы ветеринарной фармакологии и токсикологии. Материалы второго съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов России. — Казань, 2009. — С. 75—78.

5. Государственный реестр лекарственных средств для ветеринарного применения [Электронный ресурс]. — Режим доступа: www.fsvps.ru (дата обращения 22.10.13)

6.  Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др.; Под. Ред. В.В. Меньшикова — М.: Медицина, 1987, — 368 с.: ил.