МОРФОЛОГИЯ КЛЕТОК КРОВИ И ЕСТЕСТВЕННАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ КРЫС ПОСЛЕ ПРОТИВОПАРАЗИТАРНОЙ ОБРАБОТКИ ИВЕРСЕКТОМ

Введение. Паразитарные болезни животных как домашних, так и сельскохозяйственных, являются одной из самых распространенных причин развития остро и хронически протекающих заболеваний. Для лечения и профилактики таких болезней в ветеринарной медицине широко используются препараты на авермектиновой основе.

Препараты на ивермектиновой основе обладают широким спектром противопаразитарного действия, активны в отношении личиночных и половозрелых фаз развития нематод ЖКТ и легких, личинок подкожных, носоглоточных, желудочных оводов, вшей, кровососок и саркоптоидных клещей. Острая токсичность ивермектина обусловлена действием на центральную нервную систему. Препарат оказывает губительное действие на беспозвоночных благодаря взаимодействию с рецепторами гамма-аминомасляной кислоты, усиливая их связь, блокируя нервную передачу и вызывая паралич и гибель паразитов. Гамма-аминомасляная кислота обнаружена только в мозге млекопитающих в незначительном количестве и поэтому ивермектины безопасны для организма позвоночных [3].

Однако установлено, что препараты данной группы по степени воздействия на организм согласно ГОСТ 12.1.007-76 относится к умеренно опасным веществам (3 класс опасности), а основное действующее вещество — ивермектин принято относить к чрезвычайно опасным веществам (1 класс опасности) [2].

В связи с этим у животных существует потенциальная опасность нарушения гомеостаза и развития нежелательных реакций при введение терапевтических доз авермектинсодержащих препаратов.

Цель. Установить влияние терапевтической дозы авермектинсодержащего препарата Иверсекта на морфологию и количественные изменения белой крови крыс (естественную резистентность организма).

Задачи:

1.  Смоделировать условия однократной противопаразитарной обработки на модели лабораторных крыс;

2.  Оценить качественные и количественные изменения белого ростка переферической крови крыс после противопаразитарной обработки.

Материалы и методы. В эксперименте использовали препарат Иверсект (в 1 мл—10 мг ивермектина). Опыт проводили на 20 белых беспородных крысах-самцах, 6 месячного возраста, содержащихся в стандартных условиях вивария. Животные были разделены на 2 группы, по 10 крыс в каждой. Крысам первой (опытной) группы проводили однократную противопаразитарную обработку Иверсектом в терапевтической дозе (0,2 мг на 1 кг), препарат вводили подкожно.

Через четверо суток после обработки осуществляли забор крови для определения абсолютного количества лейкоцитов. Для подсчета лейкоцитов использовали гематологический анализатор Sysmex XT (Япония). Лейкограмму и морфологию клеток определяли при окраске мазков крови по Лейшману с докрашиванием по Ромоновскому-Гимза. Группой контроля служили интактные крысы.

Результаты исследования. Иверсект — противопаразитарный препарат системного действия из класса макроциклических лактонов. Ивермектин, входящий в состав препарата, представляет собой смесь гидрированных авермектинов В_1а и В_1в, обладает широким спектром противопаразитарного действия. После парентерального введения препарата ивермектин быстро всасывается из места инъекции и распределяется в органах и тканях животного, обеспечивая длительное паразитоцидное действие. Выводится из организма с мочой и желчью, у лактирующих животных — частично с молоком. В рекомендуемых дозах пpeпapaт не оказывает эмбриотоксического, тератогенного и мутагенного действия; во внешней среде быстро разрушается [2].

Таблица 1.

Абсолютное содержание лейкоцитов крови крыс при однократной противопаразитарной Иверсектом в дозе 0,2 мг/кг, ×10⁹/л, (М±m), n=10

Примечание: достоверность различий относительно контроля ٭٭-р≤0,01

На 4-е сутки после обработки крыс Иверсектом было установлено достоверное снижение абсолютного количества лейкоцитов, сегментоядерных нейтрофилов и моноцитов, что свидетельствует об угнетении костно-мозгового кроветворения, а именно его лимфоцитарного ростка.

Понижение количества нейтрофилов может быть связано с повышенным разрушением клеток в крови и тканях, вследствие ответа иммунной реакции.

Увеличение числа лимфоцитов указывает на активацию неспецифической резистентности организма. Значительное снижение моноцитов и базофилов могло произойти на почве стресса, во время подготовки забора крови у крыс.

Таблица 2.

Лейкограмма крыс при однократной противопаразитарной обработке препаратом Иверсект в дозе0,2 мг/кг, % (М±m), n=10

Примечание: достоверность различий относительно контроля ٭٭-р≤0,01

В лейкограммах крыс опытной группы регистрировали достоверное снижение доли лимфоцитов и отмечали тенденцию к снижению доли сегментоядерных нейтрофилов, что подтверждает угнетение лимфоцитарного ростка кроветворения в этот период.

Достоверное увеличение палочкоядерных нейтрофильных форм свидетельствует о стимуляции выброса незрелых форм из костного мозга в переферическую кровь.

При анализе морфологии клеток крови у животных опытной группы, по сравнению с контрольной, в мазках устанавливали следующие качественные изменения: у отдельных лимфоцитов отмечалась конденсация ядерного хроматина в глыбки, петлистость и кружевной характер хроматина ядра, (рис. 1; рис. 2) что свидетельствует о незрелости выбрасываемых костным мозгом клеток агранулоцитарного ростка.

Рисунок 1. Лимфоцит в периферической крови крысы из интактной группы

Рисунок 2. Конденсация ядерного хроматина лимфоцитов крысы опытной группы

Сегментоядерные нейтрофилы крыс опытной группы были приимущественно гиперсегментированы (содержали по 6—7 сегментов) (рис. 4), в отличии от группы контроля (4—5 сегментов) (рис. 3).

Рисунок 3. Сегментоядерный нейтрофил в периферической крови крысы интактной группы

Рисунок 4. Гиперсегментированный нейтрофил в периферической крови крысы опытной группы

Вывод. Моделирование условий противопаразитарной обработки Иверсектом у лабораторных крыс приводит к угнетению лейкоцитарного ростка костно-мозгового кроветворения. Регистрируемые при этом качественные изменения клеток лейкоцитарного ростка указывают на незрелость выбрасываемых костным мозгом клеток.

Список литературы:
1.    Азаубаева Г.С. Картина крови у животных и птицы. — Курган: «Зауралье», 2004. — 168 с.
2.    Видаль — ветеринар. Справочник лекарственных веществ — [Электронный ресурс] — Режим доступа. — URL: http://www.vidal.ru/veterinar/iversect~27747.
3.    Ивермектины. Токсичность Ивермектинов — [Электронный ресурс] — Режим доступа. — URL: http://dommedika.com/farmakology/26.html.
4.    Карпуть И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных. — Мн.: Ураджай, 1986. — 183 с.
5.    Леонова Е.В. Патофизиология системы крови. — Минск: БГМУ, 2009. — 128 с.
6.    Максимович Н.Е. Патология системы крови и методы ее диагностики. — Гродно: ГрГМУ, 2011. — 312 с.
7.    Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. Лабораторные методы исследования в клинике. — М.: Медицина, 1987. — 368 с.