Статья:
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЕТОНОВЫХ ТЕЛ МЕТОДОМ АБСОРБЦИОННОГО АНАЛИЗА
Секция: 4. Медицинские науки
Выходные данные
Шидакова М.Х., Шидакова Ф.Х. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЕТОНОВЫХ ТЕЛ МЕТОДОМ АБСОРБЦИОННОГО АНАЛИЗА // Молодежный научный форум: Естественные и медицинские науки: электр. сб. ст. по мат. XXV междунар. студ. науч.-практ. конф. № 6(24). URL: https://nauchforum.ru/archive/MNF_nature/6(24).pdf (дата обращения: 21.12.2024)
Лауреаты определены. Конференция завершена
Эта статья набрала 3 голоса
Мне нравится3
Дипломы
лауреатов
лауреатов
Сертификаты
участников
участников
Дипломы
лауреатов
лауреатов
Сертификаты
участников
участников
XXV Студенческая международная заочная научно-практическая конференция «Молодежный научный форум: естественные и медицинские науки»
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЕТОНОВЫХ ТЕЛ МЕТОДОМ АБСОРБЦИОННОГО АНАЛИЗА
Шидакова Марьям Хыйсаевна
студент Ставропольского государственного медицинского университета, РФ, г. Ставрополь
Шидакова Фатима Хыйсаевна
студент Ставропольского государственного медицинского университета, РФ, г. Ставрополь
Дюдюн Ольга Анатольевна
научный руководитель, доц. Ставропольского государственного медицинского университета, РФ, г. Ставрополь
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ.
Использование оптических методов для расширения методики лабораторного анализа содержания кетонов.
ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ.
Для качественного определения содержания кетоновых тел в моче в лабораторных условиях используются цветные пробы Ланге, Легаля и др.
Ряд фирм выпускает экспресс-тесты для определения кетоновых тел; определение с помощью таких тестов проводят строго по инструкции. Тест также основан на реакции Легаля. Цветная шкала сравнения на этикетке отражает концентрацию ацетоуксусной кислоты в моче. Реагент Легала — 1 %-ный раствор нитропруссида в 50 %-ном этанольном растворе 1 М NaOH.
Ацетон с нитропруссидом натрия в щелочной среде дает интенсивно-красную окраску. При подкислении уксусной кислотой окраска переходит в красно-фиолетовую:
CH3COCH3 + Na2[Fe(CN)5NO] + 2NaOH ® Na4[Fe(CN)5ON=CHCOOH3] + 2H2O
На основании известных методик лабораторного определения наличия кетонов была предложена усовершенствованная методика определения кетоновых тел в моче с помощью абсорбционного анализа.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
Метод абсорбционного анализа основан на способности окрашенного вещества поглощать излучение определенной длины волны, описываемой законом Бугера-Ламберта-Бера:
(1)
или в логарифмическом виде:
, (2)
где: k — молярный коэффициент поглощения света;
— оптическая плотность раствора;
c — концентрация раствора;
l — толщина оптического слоя.
Определение кетоновых тел в анализируемых растворах проводили, используя следующие методики:
1 опыт:
1. Приготовили 100 мл 1 %-ного раствора нитропруссида натрия (далее НПН) Na2[Fe(NO)(CN)5] 2H2O (чда).
2. Свежеприготовленный раствор НПН поместили в 5 пробирок по 3 мл.
3. В каждую пробирку добавили по 0,1 мл 1 М раствора NaOH (хч).
4. В каждую пробирку добавили ацетон (90 %) — 0,04; 0,08; 0,12; 0,16 и 0,2 мл, соответственно.
5. На фотометре КФК-5М провели измерение интенсивности (Ui) для всех приготовленных растворов (l=540 нм) и рассчитали оптическую плотность.
В таблице 1 представлены экспериментальные результаты и данные по оптической плотности (D) приготовленных композиций.
Таблица 1.
Результаты опыта № 1
№ п/п |
Интенсивность сигнала U, В |
Оптическая плотность
|
||
U0 |
U |
U0/U |
||
1 |
2,430 |
1,811 |
1,3418 |
0,294 |
2 |
2,440 |
1,664 |
1,4663 |
0,3828 |
3 |
2,435 |
1,530 |
1,5915 |
0,4647 |
4 |
2,438 |
1,486 |
1,6406 |
0,4951 |
5 |
2,444 |
1,292 |
1,8916 |
0,6374 |
Рисунок 1. Зависимость оптической плотности раствора от концентрации ацетона (по результатам опыта № 1)
2 опыт:
1. Свежеприготовленный раствор НПН поместили в 5 пробирок по 3 мл.
2. В каждую пробирку добавили по 0,1 мл 1 М раствора NaOH (хч).
3. В каждую пробирку добавили ацетон (90 %) — 0,04; 0,08; 0,12; 0,16 и 0,2 мл, соответственно.
4. Добавили по 0,1 мл уксусной кислоты CH3COOH (9 %).
5. На фотометре КФК-5М провели измерение интенсивности (Ui) для всех приготовленных растворов (l=540 нм) и рассчитали оптическую плотность.
Таблица 2.
Результаты опыта № 2
№ п/п |
Интенсивность сигнала U, В |
Оптическая плотность
|
||
U0 |
U |
U0/U |
||
1 |
2,433 |
1,720 |
1,4145 |
0,3468 |
2 |
2,441 |
1,556 |
1,5688 |
0,45028 |
3 |
2,435 |
1,506 |
1,6169 |
0,4805 |
4 |
2,442 |
1,478 |
1,6522 |
0,5021 |
5 |
2,439 |
1,446 |
1,6867 |
0,5228 |
Рисунок 2. Зависимость оптической плотности раствора от концентрации ацетона (по результатам опыта № 2)
3 опыт:
1. Свежеприготовленный раствор НПН поместили в 5 пробирок по 3 мл.
2. В каждую пробирку добавили по 0,1 мл 1 М раствора NaOH (хч).
3. В каждую пробирку добавили ацетон (90 %) — 0,04; 0,08; 0,12; 0,16 и 0,2 мл, соответстенно.
4. Добавили по 0,1 мл раствора аммиака NH4OH (10 %).
5. На фотометре КФК-5М провели измерение интенсивности (Ui) для всех приготовленных растворов (l=540 нм) и рассчитали оптическую плотность.
Таблица 3.
Результаты опыта № 3
№ п/п |
Интенсивность сигнала U, В |
Оптическая плотность
|
||
U0 |
U |
U0/U |
||
1 |
2,434 |
1,581 |
1,5395 |
0,4315 |
2 |
2,339 |
0,953 |
2,4544 |
0,8979 |
3 |
2,401 |
0,670 |
3,5836 |
1,2764 |
4 |
2,444 |
0,475 |
5,1453 |
1,6381 |
5 |
2,442 |
0,184 |
13,272 |
2,5856 |
Рисунок 3. Зависимость оптической плотности раствора от концентрации ацетона (по результатам опыта № 3)
Значительное увеличение оптической плотности исследуемых композиций в присутствии аммиака (опыт № 3) происходит в ходе реакции восстановления нитропруссида натрия в щелочной среде аммиаком до пентацианоамминферрата(II) натрия:
Na2[Fe(CN)5NO] + 2NH3 + NaOH ® Na3[Fe(CN)5NH3] + N2 + 2H2O,
увеличение концентрации которого в зоне реакции изменяет окраску анализируемого раствора и повышает чувствительность рассматриваемого метода абсорбционного анализа.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
1. Предложены методики построения градуировочных прямых по результатам фотометрического (абсорбционного) анализа ацетонсодержащих растворов.
2. Обнаружено значительное увеличение оптической плотности при добавлении к исходным композициям аммиака, что повышает чувствительность анализа.
Список литературы:
1. Васильев В.П. Аналитическая химия. В 2 кн.: Кн. 2: Физико-химические методы анализа: Учеб. для студ. вузов, обучающихся по химико-технол. спец. 4-е изд., стереотип. — М.: Дрофа, 2004. — 384 с.
2. Кетоновые тела в моче. Методы определения — [Электронный ресурс] — Режим доступа. — URL: http://www.clinlab.info/Ketone_bodies_in_urine.shtml (Дата обращения 15.06.2015).
