Противовоспалительные свойства производных пиразолов

Аннотация. Реакцией циклизации симметричных диацетиленовых эфиропроизводных бензойной кислоты с диазометаном были синтезированы новые производные пиразола. Полученные соединения исследованы на противовоспалительную активность и токсичность. Установлена зависимость противовоспалительной активности от химического строения синтезированных соединений, что имеет важное значение при целенаправленном синтезе биологически активных веществ.

Ключевые слова: синтез; циклизация; гетероциклы, пиразол; противовоспалительная активность; воспаление; измерение онкометрически; токсичность.

Ведущая роль в патогенезе многих заболеваний и патологических процессах принадлежит воспалительным процессам. Для его профилактики и лечения используют противовоспалительные средства – производные  пиразола, салициловой кислоты, индола, атраниловой, пропионовой кислот, коротикостероиды и др. Из названных препаратов широкое применение получили производные пиразола, которые, однако, так же как и препараты  других классов аналогичного действия, не отвечают полностью предъявляемым к ним требованиям и часто вызывают побочные эффекты и осложнения со стороны нервной, сердечно-сосудистой, пищеварительной, кроветворной и других систем [1, с. 49; 2, с.81].  В связи с этим изыскание и изучение новых высокоэффективных и малотоксичных противовоспалитель-ных препаратов является одной из актуальных проблем современной науки.

Продолжая исследования биологически активных соединений в ряду производных пиразолов с целью поиска новых противовоспалительных средств, мы синтезировали 5 новых производных. Они были получены циклизацией симметричных диацетиленовыхэфиров производные бензойной кислоты с диазометаном.

I:R=H; II: R=CI-2; III:R=CI-4; IV: R=CI₂ -2,4; V: R=CI₃ -2,4,6;

Физико-химические характеристики соединений приведены в таблице 1

Таблица 1.

Физико-химические характеристики производных пиразола

Индивидуальность полученных соединений проверяли методом ТСХ на Al₂O₃ II степени активности. Строение доказано данными ИК-спектров и элементного анализа.

Так, в ИК-спектре в интервалы частоты в области  3400-3300 см^-1 наблюдаются полосы поглощения, соответствующие валентным колебаниям группы NH пиразольного кольца, колебания же самого пиразольного кольца  наблюдаются в области 1540-1520см^-1.

Экспериментальная химическая часть

ИК-спектры сняты на спектрофотометре UR-20 (ГДР) в таблетках с KBr.

Синтез 3-(Бензоилоксиметил)-4-(бензоилоксипропинил-1) пиразол (I). К 1 г бис-(бензоилоксиметил) диацетилена постепенно добавляют 0,92 г свежеприготовленного раствора диазометана в 25 мл серного эфира. По мере обесцвечивания желтой окраски раствора добавляют свежие порции диазометана до стойкой желтой окраски. После этого выпаривают растворитель, продукт очищают методом ТСХ на Al₂O₃. ПолученныйI представляет собой кристаллы белого цвета. Выход 88,9%, т.пл. 43-44 С.

В аналогичных условиях были получены остальные производные пиразола.

Экспериментальная  биологическая часть

Синтезированные производные пиразола исследованы на токсичность и противовоспалительные свойства (таблица 2).

Действия препаратов изучали на модели воспаления, вызываемого формалином, который вводили под апоневроз голеностопного сустава в количестве 0,2 мл 1% раствора. Объем лапок подопытных животных измеряли онкометрически до и через 3, 6, 24, 48 и 72 ч после введения формалина. Испытуемые вещества вводили в виде суспензии peros с помощью металлического зонда. Каждое соединение испытывали не менее чем в 3 дозах, 2-5% раствора препаратов вводили из расчета 0,1 мл 100г массы в дозах от 100 и 200мг/кг.

Испытуемые вещества и амидопирин вводили по определенной схеме 3 раза до появления воспаления, т.е. за 48, 24ч и 30мин. до введения формалина.  Контрольные животные получали в эквивалентном объеме дистиллированную воду и суспензию аравийской камеди по той же схеме. Для сравнения был взят известный противовоспалительный препарат амидопирин, являющийся в химическом отношений близким к испытуемым соединениям. Его вводили в дозе 100 мг/кг.так как, по литературным данным в этой дозе он дает выраженный противовоспалительный эффект. Исследования осуществляли на белых крысах массой 150-200 г.

Таблица 2.

Противовоспалительная активность (в %) производных поразила

Установлено, что все соединения в той или иной степени обладают противовоспалительной активностью, которая особенно заметна через 3 ч после введения формалина.  Выраженное противовоспалительное действие оказывает соединение III, которое в дозе 100мг/кг подавляет развитие отека соответственно на 87%.

Менее выраженный эффект был отмечен у II соединения, уступающего по активности амидопирину. Среди изученных соединений промежуточное положению занимают I, IV, V. Они по активности приравниваются к амидопирину.

Вместе с тем при сравнительном изучении противовоспалительной активности производных пиразолов в зависимости от их химической структуры выявлены определенные закономерность связи. Так, например, наиболее высокой активностью обладает соединение III, содержащее в пара-положении хлор. Сравнительно менее выраженное противовоспалительное действие оказывают соединения IV и V. Расположение хлора в орто - положении (II)  приводит к снижению противовоспалительной активности.

Таким образом, приведенная закономерность связи между противовос-палительной активностью и химической структурой в изученном ряду производных пиразола может быть использована для целенаправленного синтеза более совершенных препаратов аналогичного действия.

Токсичность изучали на белых мышах обоего пола массой 18-23 г. Вещества вводили в виде 1-10% масляного раствора подкожно. Препараты в каждой дозе испытывали не менее чем на 6 животных. Объем вводимого раствора не превышал 1мл. Значение средней смертельной дозы (LD₅₀) определяли по методам Личфилда-Уилкоксона при P=0,05. Установлено, что синтезированные соединения малотоксичны: даже в дозах 1500мг/кг они не вызывали гибели животных. Токсичность амидопирина 250 (221,2-282,5) мг/кг.

Таким образом, синтезированные новые производные пиразола обладают малой токсичностью и сравнительно высокой противовоспалительной активностью.