ИССЛЕДОВАНИЕ СОЛЕЙ НЕКОТОРЫХ ПЕПТИДОВ, ПРОДУЦИРУЕМЫХ БАКТЕРИЯМИ РОДА BACILLUS НА АНТИБАКТЕРИАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ

STUDY OF SALTS OF SOME PEPTIDES PRODUCED BY BACTERIA OF THE GENUS BACILLUS FOR ANTIBACTERIAL ACTIVITY

Leonid Rabinovich

Director of Tula Pharmaceutical Factory, Russia, Tula

Аннотация. Бактерицидное и бактериостатическое действие пептидых циклических молекул является известным фактом. В основном все препараты выпускаются в виде гирохлоридов. Данное исследование показывает, что полученные соли известного пептида, содержащие различные органические анионные остатки обладают сопоставимой антибактериальной активностью.

Abstract. The bactericidal and bacteriostatic action of peptide cyclic molecules is a known fact. Basically, all drugs are available in the form of gyrochlorides. This study shows that the obtained salts of the known peptide containing various organic anionic residues have comparable antibacterial activity.

Ключевые слова: органические соли циклических пептидов; антибактериальная активность; minimum overwhelming concentration; minimum bactericidal concentration.

Keywords: organic salts of cyclic peptides; antibacterial activity; minimum overwhelming concentration; minimum bactericidal concentration.

Циклический полипептидный антибиотик (Рисунок 1), состоящий из остатков L-валина, L-орнитина, L-лейцина, D-фенилаланина и L-пролина, впервые был выделен из культуры палочки Bacillus brevis. Он оказывает выраженное противомикробное действие в отношении большинства возможных возбудителей бактериальной природы, вызывающих инфекционные заболевания полости рта и глотки [1], а также бактериостатическое и бактерицидное действие на патогенные стафилококки, стрептококки, пневмококки, анаэробные агенты и другие микроорганизмы [2-4].

Рисунок 1. Циклический полипептидный антибиотик, выделенный из культуры палочки Bacillus brevis

Известно, что в зависимости от формы, в виде которой находится действующее вещество, может изменятся терапевтический эффект препарата.

Задачей данного исследования было сравнить антимикробную активность присутствующего на рынке гидрохлорида данного полипептида 1а и полученных нами солей на его основе, а именно: ацетата 2а, цитрата 2б, гидроцитрата 2в, дигидроцитрата 2г, малеата 2д, гидромалеата 2е, фумарата 2ж, гидрофумарата 2з, оксалата 2и, гидрооксалата 2к, бензоата 2л, лактата 2м, аскорбата 2н, малата 2о, гидромалата 2п,  малоната 2р и гидромалоната 2 с (см. табл. 1).

В качестве тест-объектов для определения минимальной подавляющей концентрации (МПК) и минимальной бактерицидной концентрации (МБК) были использованы штаммы Васillus cereus, var. mycoides 537, Staphylococcus aureus 209 P, Pseudomonas aeruginosa NCTC 2134. Микроорганизмы выращивали в жидкой среде на мясо-пептонном бульоне, при рН 7,2- 7,4 в течение 18-20 часов температуре 36 ± 1 °С. Для тестирования использовались взвеси культур, из которых готовились рабочие растворы, рекомендованные для конкретного микроорганизма по МУК 4.2.1890-04.

Суспензию бактерий переносили в пробирки, к ним добавляли исследуемые соединения, растворенные в 96 % этиловом спирте и доведенные до конкретной концентрации водой. Далее выполнялось серийное двукратное разведение этих соединений. Максимальная концентрация веществ в серии составляла 0,176 ммоль/мл, минимальная – 1,4 мкмоль/мл. Исследование выполнялось в 3 повторах для каждого соединения. Учитывался средний результат. Ингибирование роста бактерий оценивали через 20 ч по значению оптической плотности, при длине волны 595 нм. За МПК принимали то наибольшее разведение, при котором оптическое поглощение культуры было сопоставимо с контролем, хранившемся в холодильнике при 4 °С.

При определении МБК, исследуемые вещества в концентрациях превышающих МПК в 2 и 4 переносили на чашки Петри с агаризованной средой (20 г/л агара) и равномерно растирали по площади чашек стерильным шпателем. Чашки инкубировали в течение 48 часов. МБК определяли как наименьшую концентрацию исследуемого соединения, при которой не наблюдается роста колоний.

Таблица 1.

Результаты сравнения антимикробной активности

По данным, представленным в таблице 1 можно сделать вывод, что полученные соли 2 а-с полипептида 1 проявляют бактеристатическую и бактерицидную активность в терапевтических концентрациях. А также антибактериальная активность соединений 2 а-с и 1а сопоставима.

Таким образом, соли 2 а-с могут быть использованы в качестве антибактериальных средств.