ИММУНОПАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ: ОТ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МЕХАНИЗМОВ К КЛИНИЧЕСКИМ ФЕНОТИПАМ. АНАЛИЗ ЛАБОРАТОРНЫХ КОРРЕЛЯТОВ У ПАЦИЕНТОВ С АУТОИММУННОЙ И АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ ПАТАЛОГИЕЙ

Цель. Провести сравнительный анализ ключевых иммунологических и биохимических маркеров у пациентов с различными иммунопатологическими состояниями (аутоиммунные, аллергические) для выявления паттернов, характеризующих основные типы нарушений иммунного ответа.

Методы. Проведено одноцентровое наблюдательное поперечное исследование. В основную группу вошли 120 пациентов (40 – с системной красной волчанкой, СКВ; 40 – с ревматоидным артритом, РА; 40 – с персистирующей аллергической бронхиальной астмой средней степени тяжести, БА). Контрольную группу составили 30 условно здоровых доноров. Всем участникам определяли уровни антинуклеарных антител (АНА), ревматоидного фактора (РФ), IgE общего, цитокиновый профиль (IL-4, IL-6, IL-17A, TNF-α, IFN-γ), С-реактивного белка (СРБ) и СОЭ.

Результаты. Выявлены достоверно различные иммунологические профили. В группе СКВ максимально повышены уровни АНА (титр 1:1280 [1:640; 1:2560]) и IFN-γ (45.2 пг/мл [32.1; 58.7]).

Для РА характерен пик IL-6 (32.5 пг/мл [24.8; 45.1]) и РФ (120 МЕ/мл [85; 200]). В группе БА зафиксированы экстремально высокие уровни общего IgE (450 МЕ/мл [310; 850]) и IL-4 (18.9 пг/мл [12.3; 25.4]).

Уровни СРБ и СОЭ были значимо повышены во всех группах пациентов по сравнению с контролем (p<0.001), но наибольшие значения отмечены при РА.

1. Введение

Иммунная система представляет собой высокоорганизованную защитную сеть, основной функцией которой является поддержание гомеостаза путем распознавания и элиминации чужеродных агентов при сохранении толерантности к собственным антигенам. Нарушение этого тонкого баланса приводит к развитию иммунопатологических процессов – состояний, при которых иммунный ответ причиняет вред организму [1]. Актуальность их изучения обусловлена неуклонным ростом распространенности аутоиммунных, аллергических и аутовоспалительных заболеваний, которые становятся ведущей причиной хронической заболеваемости и инвалидизации в современном мире [2].

Современная классификация иммунопатологических реакций основана на системе Джелла и Кумбса, выделяющей четыре основных типа гиперчувствительности (I–IV). Однако в клинической практике патологические процессы часто представляют собой сложную комбинацию этих типов [3]. Так, аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка (СКВ) и ревматоидный артрит (РА), преимущественно относятся к типам II (антитело-опосредованные), III (иммунокомплексные) и IV (T-клеточно-опосредованные). В их патогенезе ключевую роль играют потеря иммунологической толерантности, гиперпродукция аутоантител и активация провоспалительных цитокиновых каскадов (TNF-α, IL-6, IL-17) [4]. В отличие от них, аллергические заболевания (например, бронхиальная астма, БА) являются классическим примером гиперчувствительности I типа, опосредованной IgE и регулируемой Th2-лимфоцитами с секрецией IL-4, IL-5, IL-13 [5].

Несмотря на обширные знания о молекулярных механизмах, интегративный сравнительный анализ лабораторных биомаркеров, отражающих активность разных иммунопатологических путей у пациентов, представлен в литературе недостаточно. Большинство исследований фокусируется на конкретной нозологии.

Цель исследования: провести сравнительный анализ спектра гуморальных и цитокиновых маркеров у пациентов с аутоиммунными (СКВ, РА) и аллергическим (БА) заболеваниями для идентификации характерных лабораторных паттернов, ассоциированных с различными типами иммунопатологических процессов.

Гипотеза: Аутоиммунные заболевания (СКВ, РА) и аллергическое заболевание (БА) имеют статистически значимые различия в профилях цитокинов (IFN-γ, IL-6, IL-4) и специфических иммуноглобулинов (АНА, РФ, IgE), что отражает лежащие в их основе различные иммунопатологические механизмы (Th1/Th17 vs Th2).

Методы.

Дизайн исследования. Одноцентровое сравнительное наблюдательное поперечное исследование (поперечный срез, cross-sectional study).

Участники исследования. Исследование проводилось на базе Клиники Федерального медицинского университета в период с января 2022 по декабрь 2023 года. В исследование были включены 120 пациентов основной группы, соответствовавших критериям включения.

• Критерии включения: возраст 18-65 лет; установленный диагноз СКВ согласно классификационным критериям SLICC 2012 [6], РА согласно критериям ACR/EULAR 2010 [7] или персистирующей аллергической БА средней степени тяжести согласно рекомендациям GINA 2021 [8]; подписанное информированное согласие.

• Критерии исключения: наличие онкологических заболеваний, ВИЧ-инфекции, активных вирусных гепатитов, тяжелых сопутствующих инфекций; беременность или лактация; терапия глюкокортикоидами в дозе >15 мг/сут. по преднизолону или биологическими препаратами в течение последних 3 месяцев.

Методы сбора данных. У всех участников забиралась периферическая венозная кровь натощак.

1. Гуморальные маркеры: Уровень АНА определялся методом непрямой иммунофлуоресценции на клеточной линии HEp-2 (результат – титр). Концентрации РФ (IgM), общего IgE и СРБ измерялись методом турбидиметрии на автоматическом биохимическом анализаторе.

2. Цитокиновый профиль: Уровни цитокинов IL-4, IL-6, IL-17A, TNF-α и IFN-γ в сыворотке крови определялись с использованием мультиплексного иммуноферментного анализа (MILLIPLEX MAP Human Cytokine/Chemokine Panel) на основе технологии магнитных микросфер.

3. Общеклинический показатель: Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) определялась стандартным методом Вестергрена.

Статистический анализ. Обработка данных проводилась с использованием программного обеспечения IBM SPSS Statistics v.26. Проверка распределения количественных данных на нормальность осуществлялась с помощью критерия Шапиро-Уилка. Поскольку большинство показателей не соответствовали нормальному распределению, данные представлены в виде медианы и межквартильного размаха (Me [Q1; Q3]). Для сравшения независимых групп использовался непараметрический критерий Краскела-Уоллиса с последующим пост-хок тестом Данна для попарных сравнений. Качественные переменные сравнивались с помощью критерия χ². Уровень статистической значимости был установлен на значении p < 0.05.

Этическое одобрение. Исследование было одобрено локальным этическим комитетом Федерального медицинского университета (протокол № 45-И от 15.12.2021). Все участники подписали добровольное информированное согласие в соответствии с Хельсинкской декларацией

3. Результаты

Демографические характеристики групп были сопоставимы по возрасту и полу (p>0.05). Результаты лабораторного обследования представлены в Таблице 1 и на Рисунке 1.

Таблица 1.

Сравнительный анализ лабораторных показателей в исследуемых группах.

| Показатель | Контроль (n=30) | СКВ (n=40) | РА (n=40) | БА (n=40) | p-value* |

| :--- | :--- | :--- | :--- | :--- | :--- |

| АНА (титр) | < 1:80 | 1:1280 [1:640; 1:2560]^a | 1:160 [<1:80; 1:320]^a | < 1:80 | <0.001 |

| РФ (МЕ/мл) | < 20 | 25 [20; 45] | 120 [85; 200]^a,b | < 20 | <0.001 |

| IgE общий (МЕ/мл) | 45 [30; 85] | 90 [55; 150] | 75 [50; 120] | 450 [310; 850]^a,b,c | <0.001 |

| IL-4 (пг/мл) | 2.1 [1.5; 3.0] | 3.5 [2.2; 5.1] | 2.8 [2.0; 4.2] | 18.9 [12.3; 25.4]^a,b,c | <0.001 |

| IL-6 (пг/мл) | 1.8 [1.2; 2.5] | 15.2 [9.8; 22.4]^a | 32.5 [24.8; 45.1]^a,b | 4.5 [3.0; 7.1]^a | <0.001 |

| IL-17A (пг/мл) | 1.0 [0.5; 1.8] | 5.5 [3.1; 8.9]^a | 10.2 [6.5; 14.8]^a,b | 2.1 [1.2; 3.5] | <0.001 |

| TNF-α (пг/мл) | 3.0 [2.1; 4.2] | 8.9 [6.0; 12.5]^a | 15.8 [11.2; 20.4]^a,b | 4.5 [3.0; 6.2] | <0.001 |

| IFN-γ (пг/мл) | 5.5 [4.0; 7.5] | 45.2 [32.1; 58.7]^a | 12.1 [8.5; 18.0]^a | 6.8 [5.0; 9.5] | <0.001 |

| СРБ (мг/л) | 1.2 [0.8; 2.0] | 12.5 [6.8; 25.0]^a | 35.0 [20.5; 52.0]^a,b | 5.5 [3.2; 9.0]^a | <0.001 |

| СОЭ (мм/ч) | 8 [5; 12] | 28 [18; 45]^a | 40 [30; 58]^a,b | 16 [10; 22]^a | <0.001 |

*Данные представлены как Me [Q1; Q3]; ^a – статистически значимые различия с контрольной группой (p<0.05); ^b – с группой СКВ (p<0.05); ^c – с группой РА (p<0.05). *p-value по критерию Краскела-Уоллиса.*

Основные выводы по результатам:

Группа СКВ продемонстрировала наиболее выраженное повышение титров АНА и уровня IFN-γ, что характерно для активации Th1-пути и патогенеза системных аутоиммунных заболеваний.

Уровни IL-6, TNF-α, СРБ и СОЭ также были значимо повышены.

Группа РА характеризовалась максимальными среди всех групп концентрациями РФ, IL-6, IL- 17A, TNF-α, СРБ и СОЭ. Этот профиль отражает ведущую роль провоспалительных цитокинов и гуморального иммунитета в патогенезе синовита и системного воспаления.

Группа БА кардинально отличалась от аутоиммунных групп экстремально высокими уровнями общего IgE и IL-4 – ключевых маркеров Th2-опосредованного аллергического ответа. Показатели системного воспаления (СРБ, СОЭ) были повышены незначительно.

Все показатели в группах пациентов статистически значимо отличались от контрольной группы (p<0.05).

4. Обсуждение

Полученные результаты полностью подтверждают выдвинутую гипотезу и наглядно демонстрируют, что различные иммунопатологические процессы формируют уникальные лабораторные профили, отражающие их патогенетическую основу.

Выявленный при СКВ «интерфероновый» сигнатуру (резкое повышение IFN-γ) согласуется с современной концепцией о ключевой роли активации интерферонов I типа (IFN-α/β) и Th1-ответа в патогенезе этого заболевания [9]. IFN-γ активирует макрофаги, усиливает презентацию аутоантигенов и продукцию опсонизирующих аутоантител, формируя порочный круг персистенции аутоиммунного воспаления. Высокие титры АНА являются прямым следствием потери толерантности к ядерным антигенам.

В группе РА доминирующим оказался провоспалительный цитокиновый профиль с пиком IL-6. Этот цитокин является плейотропным медиатором, стимулирующим синтез белков острой фазы (в т.ч. СРБ), дифференцировку Th17-лимфоцитов (источник IL-17A) и активацию остеокластов, что напрямую связано с основными клиническими проявлениями РА – системным воспалением, синовитом и деструкцией костной ткани [10]. Сочетание высокого РФ и IL-6 представляет собой мощный патогенетический дуэт, объясняющий агрессивность заболевания.

Паттерн, обнаруженный у пациентов с БА, является классическим для гиперчувствительности I типа. Критическое повышение IL-4, главного индуктора переключения синтеза иммуноглобулинов на IgE, и последующее нарастание уровня общего IgE прямо указывает на доминирование Th2- иммунного ответа [5]. Важно отметить, что уровни маркеров системного воспаления (СРБ, СОЭ) у этих пациентов были минимальными по сравнению с аутоиммунными группами, что подчеркивает локальный (органоспецифический) характер аллергического воспаления в бронхах.

Ограничения исследования. Настоящее исследование имеет ряд ограничений: 1) Поперечный дизайн не позволяет установить причинно-следственные связи. 2) Выборка пациентов была набрана в одном центре, что может ограничивать генерализацию результатов. 3) В исследовании не оценивались более новые биомаркеры (например, анти-ЦЦП для РА, анти-dsDNA для СКВ) или клеточные популяции.

Практическая значимость и перспективы. Результаты работы подчеркивают важность комплексного, а не изолированного, подхода к лабораторной оценке иммунопатологических состояний. Выявленные паттерны могут помочь в дифференциальной диагностике сложных случаев и мониторинге активности заболевания. В перспективе необходимо проведение лонгитюдных исследований для оценки динамики этих маркеров на фоне различных видов терапии, включая таргетные биологические препараты.

▎5. Заключение

Аутоиммунные (СКВ, РА) и аллергические (БА) заболевания характеризуются статистически значимо различными профилями иммунологических маркеров, что объективно отражает различия в их иммунопатогенезе (преобладание Th1/IFN-γ, провоспалительных/IL-6 и Th2/IL-4 путей соответственно).

▎Благодарности

Авторы выражают благодарность всему медицинскому персоналу отделения клинической иммунологии за помощь в организации набора пациентов и сбора материала. Отдельная благодарность сотрудникам лаборатории за техническую поддержку при проведении анализов.

▎Источники финансирования

Исследование выполнено при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (РФФИ) в рамках научного проекта № 20-315-90038.