Статья:

Уровень транскриптов генов Tnf и Nfkb2 при ишемии/реперфузии головного мозга у крыс и введении дигидрохинолинового производного

Конференция: XXXVIII Студенческая международная научно-практическая конференция «Естественные и медицинские науки. Студенческий научный форум»

Секция: Биология

Выходные данные
Лебедева Е.Ю., Михайлова Е.Г. Уровень транскриптов генов Tnf и Nfkb2 при ишемии/реперфузии головного мозга у крыс и введении дигидрохинолинового производного // Естественные и медицинские науки. Студенческий научный форум: электр. сб. ст. по мат. XXXVIII междунар. студ. науч.-практ. конф. № 4(38). URL: https://nauchforum.ru/archive/SNF_nature/4(38).pdf (дата обращения: 28.07.2021)
Лауреаты определены. Конференция завершена
Эта статья набрала 0 голосов
Мне нравится
Дипломы
лауреатов
Сертификаты
участников
Дипломы
лауреатов
Сертификаты
участников
на печатьскачать .pdfподелиться

Уровень транскриптов генов Tnf и Nfkb2 при ишемии/реперфузии головного мозга у крыс и введении дигидрохинолинового производного

Лебедева Елизавета Юрьевна
студент, Воронежский государственный университет, РФ, г. Воронеж
Михайлова Евгения Геннадьевна
студент, Воронежский государственный университет, РФ, г. Воронеж
Крыльский Евгений Дмитриевич
научный руководитель, доцент, Воронежский государственный университет, РФ, г. Воронеж
Попова Татьяна Николаевна
научный руководитель, декан, кафедра медицинской биохимии и микробиологии, Воронежский государственный университет, РФ, г. Воронеж

 

Сердечно-сосудистые заболевания, в том числе цереброваскулярные, являются ведущими причинами смертности населения в РФ: на их долю приходится более 55% от общего числа смертей от всех причин [1]. Ишемия/реперфузия головного мозга (ИРГМ) – это патологическое состояние, связанное с развитием кислородного голодания ткани головного мозга и последующим восстановлением нормального кровотока -  реперфузией. В основе патогенеза ИРГМ лежит каскад нейрохимических процессов, таких как окислительный стресс, глутаматная эксайтотоксичность, дисфункция гематоэнцефалического барьера, микрососудистые повреждения, гемостатическая активация, постишемическая аутоиммунная реакция и патологический апоптоз [2].

При развитии окислительного стресса происходит накопление большого количества свободных радикалов (СР), что приводит к формированию очага воспаления, активизации макрофагов, Т-лимфоцитов, нейтрофилов. В данных условиях происходит активизация транскрипционного ядерного фактора NF-κB, способствующего синтезу провоспалительных цитокинов [3].

Из этого следует, что исследования, связанные с поиском веществ, проявляющих противовоспалительную и антиоксидантную активность при ИРГМ, являются актуальными. В этом ключе интерес представляет 6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолин (ДГХ), обладающий высоким антиокислительным потенциалом [4].

Целью данной работы было исследование влияния ДГХ на уровень экспрессии генов фактора некроза опухоли-альфа (Tnf) и белка p100 – предшественника ядерного фактора κB (Nfkb2) в головном мозге крыс с индуцированной ишемией/реперфузией.

В качестве объекта исследования использовали самцов белых лабораторных крыс (Rattus norvegicus) массой 200-250 г, содержащихся в условиях 12-часового светового дня, комнатной температуры и доступа к воде и пище at libitum. ИРГМ моделировали с помощью 30-минутной окклюзии общих сонных артерий с последующим снятием окклюзоров. Экспериментальные животные были разделены на три группы: 1 -ая группа - ложнооперированные (контрольная группа); 2-ая группа - крысы с ИРГМ; 3 группа - животные с ИРГМ, которые подвергались внутрибрюшинным инъекциям ДГХ в 1 мл физиологического раствора один раз в день в дозе 50 мг/кг.

Экстракцию тотальной клеточной РНК осуществляли с помощью реагента «ExtractRNA» (Евроген, Россия). Синтез первой цепи комплементарной ДНК осуществляли с помощью рекомбинантной обратной транскриптазы вируса мышиного лейкоза Молони-M-MuLV. В качестве затравки применяли смесь праймеров олиго-(dТ)15 и Random (dN)10 в соотношении 1:1. Постановку реакции ПЦР-РВ в присутствии интеркалирующего красителя SYBR GreenI проводили с помощью набора компании «Евроген» (Россия). Реакцию проводили на приборе АНК - 32 (Синтол, Россия). Расчет относительного уровня мРНК исследуемых генов проводили с помощью 2-ΔΔCt метода.

Результаты исследований обрабатывали с применением t-критерия Стьюдента с расчетом среднего значения, стандартного отклонения. Достоверно различающимися считали показатели, для которых р <0,05.

В ходе проведенного исследования было установлено, что у крыс второй экспериментальной группы экспрессия генов Tnf и Nfkb2 возрастала по сравнению с контрольной группой в 3,5 и 1,8 раз соответственно. Результаты могут свидетельствовать об активации воспаления в условиях интенсификации свободно-радикального окисления при ИРГМ. Известно, что NF-κB играет важную роль во врождённом и адаптативном иммунном ответе. Повышение уровня NF-κB ведет к нарушению классических механизмов апоптоза клеток и развитию воспаления. У животных третьей экспериментальной группы уровень транскриптов Tnf и Nfkb2 снижался в 1,9 и 1,1 раза соответственно, относительно показателей при патологии. Результаты могут свидетельствовать об уменьшении степени выраженности ОС и воспалительных процессов в ответ на введение ДГХ.

Таким образом, в ходе работы получены результаты, которые могут свидетельствовать о наличии антиоксидантной и противовоспалительной активности у ДГХ, а также возможности регулировать уровень экспрессии генов Tnf и Nfkb2 при ИРГМ. Исходя из этого, исследование ДГХ как вещества, обладающим нейропротекторной активностью, является перспективным направлением.

 

Работа выполнена при поддержке гранта Президента РФ для молодых ученых-кандидатов наук МК-254.2020.4

 

Список литературы: 
1. Российское медицинское общество по артериальной гипертонии. Артериальная гипертония у взрослых. Клинические рекомендации. МКБ-10: I10/I11/I12/.I13/I15. 
2. The protective effect and its mechanism of 3-n-butylphthalide pretreatment on cerebral ischemia reperfusion injury in rats / R.Y.  Yan [et al.]  / Eur Rev Med Phar­macol Sci.  -  2017.  -  V.  21, No22.  -  P.  5275-5282. 
3. Stockley R.A. Neutrophils and protease/antiprotease imbalance. Am J Respir Crit Care Med 1999; 160: 49—52.
4. Воздействие 6-гидрокси-2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолина на интен¬сивность свободнорадикальных процессов и активность ферментов окислитель¬ного метаболизма при токсическом поражении печени у крыс / Д. А. Бражникова [и др.] / Биомедицинская химия. - 2019. - Т. 65, No 4. - С. 331-338.