Хроматография в тонком слое как метод исследования природных полифенолов

Введение

В современном мире интерес потребителя к использованию природных биологически активных веществ (БАВ) для лечения и профилактики различных заболеваний продолжает уверенно расти [1, 2]. Одним из наиболее популярных классов БАВ являются растительные полифенолы, широко применяемые в современной медицине. Тонкослойная (планарная) хроматография занимает одно из ведущих мест в качественном и полуколичественном экспресс-анализе сложных природных, фармацевтических, медико-биологических и химических объектов. Несмотря на существовавшие до недавнего времени недостатки, она широко используется для качественного анализа смесей, в основном, за счет дешевизны и скорости получения результатов [3].

Целью нашей работы является анализ компонентов растительных экстрактов с помощью ТСХ метода.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1.  Определить качественный и количественный состав БАВ в растительных экстрактах.

2.  Выявить условия наилучшего распределения веществ при использовании разных систем и пластинок разных производителей.

Объекты и методы исследования

Объектами исследования явились экстракты следующих растений: боярышник крова́во-кра́сный (Crataégus sanguínea), морковь посевная (Daucus carota), кровохлёбка лека́рственная (Sanguisórba officinális), шалфе́й лека́рственный (Sālvia officinālis), Ммали́на обыкнове́нная (Rúbus idáeus), подоро́жник большо́й (Plantágo májor), марья́нник лугово́й (Melampýrum pratense), вероника длиннолистная (Veronica longifolia).

Экстракты из ЛРС готовились согласно методике, рекомендованной ГФ XIII; ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратов» (экстрагент спирт – 70%, метод I).

Методика выполнения работы включала проведение следующих основных операций: нанесение анализируемых проб на слой сорбента пластинок «Silufol» и “Sorbfil”; подготовка систем БУВ 4:1:5 и 4:1:3; помещение пластинок в камеры с системами растворителей; обработка пластинок реактивом-проявителем алюминия хлоридом 5%; обнаружение пятен на слое сорбента при УФ-свете при обработке парами 25% аммиака; качественная и полуколичественная оценка полученного разделения, включая определение величины удерживания и определение содержания вещества в зонах на хроматограмме. Пробы наносились в виде точки 5–7 мм при помощи капилляра на пластинки “Silufol” длиной 13 см и 15 см и “Sorbfil” длиной 10 см.

После разделения веществ пластинки облучали УФ-светом. Флуоресцировать в УФ-свете способно значительное количество веществ, полученные пятна имеют при этом различный оттенок. Для обнаружения флуоресцирующих веществ или веществ, поглощающих в УФ-области спектра, использовали источники света с максимумами излучения в области 254 и 365 мкм.

Результаты и обсуждение

Полученные результаты представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1.

Результаты хроматографического исследования на пластинках “Sorbfil”

Таблица 2.

Результаты хроматографического исследования на пластинках “Silufol”

Полученные пятна на хроматограммах позволяют сделать заключение о наличии биологически активных веществ фенольной природы во всех видах исследуемого ЛРС. Интенсивность окраски пятен и площадь позволяет судить об их высокой концентрации. Таким образом, полученные результаты позволяют сделать следующие выводы:

1.  Метод ТСХ пригоден для предварительного качественного и полуколичественного определения содержания БАВ в ЛРС.

2.  Распределение веществ на пластинке “Silufol” идет лучше, чем на пластинках “Sorbfil”, так как длина пластинки увеличивает пробег вещества, и следовательно, обеспечивая более эффективное разделение веществ. Пластинки марки “Silufol” обеспечивают более четкие границы пятен исследуемых веществ.

3.  Для определения флавоноидов и фенолокарбоновых кислот предпочтительнее система БУВ 4:1:5, так как именно эта система обеспечивает оптимальное разделение веществ. Использование системы БУВ 4:1:3 не дает такого эффекта.