Статья:

Хроматография в тонком слое как метод исследования природных полифенолов

Конференция: XLII Студенческая международная заочная научно-практическая конференция «Молодежный научный форум: естественные и медицинские науки»

Секция: Медицина и фармацевтика

Выходные данные
Телекулова А.М. Хроматография в тонком слое как метод исследования природных полифенолов // Молодежный научный форум: Естественные и медицинские науки: электр. сб. ст. по мат. XLII междунар. студ. науч.-практ. конф. № 2(41). URL: https://nauchforum.ru/archive/MNF_nature/2(41).pdf (дата обращения: 22.08.2018)
Лауреаты определены. Конференция завершена
Эта статья набрала 1 голос
Мне нравится
Дипломы
лауреатов
Сертификаты
участников
Дипломы
лауреатов
Сертификаты
участников
на печатьскачать .pdfподелиться

Хроматография в тонком слое как метод исследования природных полифенолов

Телекулова Асель Минжановна
студент, Оренбургский государственный медицинский университет, РФ, г. Оренбург
Немерешина Ольга Николаевна
научный руководитель, канд. биол. наук, доц., Оренбургский государственный медицинский университет, РФ, г. Оренбург

Введение

В современном мире интерес потребителя к использованию природных биологически активных веществ (БАВ) для лечения и профилактики различных заболеваний продолжает уверенно расти [1, 2]. Одним из наиболее популярных классов БАВ являются растительные полифенолы, широко применяемые в современной медицине. Тонкослойная (планарная) хроматография занимает одно из ведущих мест в качественном и полуколичественном экспресс-анализе сложных природных, фармацевтических, медико-биологических и химических объектов. Несмотря на существовавшие до недавнего времени недостатки, она широко используется для качественного анализа смесей, в основном, за счет дешевизны и скорости получения результатов [3].

Целью нашей работы является анализ компонентов растительных экстрактов с помощью ТСХ метода.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1.  Определить качественный и количественный состав БАВ в растительных экстрактах.

2.  Выявить условия наилучшего распределения веществ при использовании разных систем и пластинок разных производителей.

Объекты и методы исследования

Объектами исследования явились экстракты следующих растений: боярышник крова́во-кра́сный (Crataégus sanguínea), морковь посевная (Daucus carota), кровохлёбка лека́рственная (Sanguisórba officinális), шалфе́й лека́рственный (Sālvia officinālis), Ммали́на обыкнове́нная (Rúbus idáeus), подоро́жник большо́й (Plantágo májor), марья́нник лугово́й (Melampýrum pratense), вероника длиннолистная (Veronica longifolia).

Экстракты из ЛРС готовились согласно методике, рекомендованной ГФ XIII; ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратов» (экстрагент спирт – 70%, метод I).

Методика выполнения работы включала проведение следующих основных операций: нанесение анализируемых проб на слой сорбента пластинок «Silufol» и “Sorbfil”; подготовка систем БУВ 4:1:5 и 4:1:3; помещение пластинок в камеры с системами растворителей; обработка пластинок реактивом-проявителем алюминия хлоридом 5%; обнаружение пятен на слое сорбента при УФ-свете при обработке парами 25% аммиака; качественная и полуколичественная оценка полученного разделения, включая определение величины удерживания и определение содержания вещества в зонах на хроматограмме. Пробы наносились в виде точки 5–7 мм при помощи капилляра на пластинки “Silufol” длиной 13 см и 15 см и “Sorbfil” длиной 10 см.

После разделения веществ пластинки облучали УФ-светом. Флуоресцировать в УФ-свете способно значительное количество веществ, полученные пятна имеют при этом различный оттенок. Для обнаружения флуоресцирующих веществ или веществ, поглощающих в УФ-области спектра, использовали источники света с максимумами излучения в области 254 и 365 мкм.

Результаты и обсуждение

Полученные результаты представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1.

Результаты хроматографического исследования на пластинках “Sorbfil”

Вид растения

пятна

Окраска

Пятна

Rf

Группа

веществ

БУВ 4:1:5

Боярышник

кроваво-красный

1

 

2

3

4

Желто-коричневое

Желтое

Голубое

Желтое

0,31

 

0,46

0,75

0,88

Флавоноиды

 

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Морковь

посевная

1

 

2

3

4

 

Светло-желтое

Коричневое

Голубое

Ярко-голубое

0,13

 

0,25

0,41

0,75

Фенолокислоты

 

Флавоноиды

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Кровохлебка

лекарственная

1

2

 

3

4

5

 

Черное

Светло-коричневое

Голубое

Коричневое

Желтое

 

0,2

0,38

 

0,5

0,66

Танниды

Флавоноиды

 

Фенолокислоты

Флавоноиды

Фенолокислоты

Шалфей

лекарственный

1

2

3

 

4

 

5

6

 

Коричневое

Бурое

Желто-коричневое

Грязно-голубое

Желтое

Грязно-желтое

0,08

0,19

0,25

 

0,45

 

0,69

0,88

Флавоноиды

Танниды

Флавоноиды

 

Фенолокислоты

 

Фенолокислоты

Фенолокислоты

Малина

обыкновенная

 

1

 

2

 

3

 

4

5

6

Светло-коричневое

Темно-коричневое

Светло-коричневое

Коричневое

Голубое

Голубое

0,19

 

0,26

 

0,34

 

0,5

0,79

0,89

Флавоноиды

 

Флавоноиды

 

Флавоноиды

 

Флавоноиды

Фенолокислоты

Фенолокислоты

 

Таблица 2.

Результаты хроматографического исследования на пластинках “Silufol

Вид растения

Пластинка

№ пятна

Окраска пятна

Rf

Группа

веществ

БУВ 4:1:5

Малина обыкновенная

1

1

Голубое

0,85

Фенолокислоты

Шалфей лекарственный

1

 

2

3

Желто-зеленое

Бурое

Светло-бурое

0,10

 

0,27

0,85

 

Фенолокислоты

 

Танниды

Таниды

Кровохлебка лекарственная

1

 

2

3

4

Темно-бурое

Голубое

Бурое

Желтое

0,2

0,45

0,85

0,90

Танниды

 

Фенолокислоты

Танниды

Полифенолы

Морковь посевная

1

 

2

3

Ярко-голубое

Бурое

Темно-бурое

0,79

 

0,25

0,86

Фенолокислоты

 

Танниды

Танниды

 

Боярышник кроваво-красный

 

1

 

2

 

3

4

 

Грязно-желтое

Ярко-голубое

Желтое

Бурое

 

0,13

 

0,75

 

0,83

0,91

 

Фенолокислоты

 

Фенолокислоты

 

Полифенолы

Танниды

Марьяник луговой

2

1

2

Оранжевое

Темно-синее

0,92

 

Полифенолы

Фенолокислоты

Шалфей лекарственный

1

 

2

3

Желто-коричневое

Бурое

Желтое

0,042

 

0,83

0,86

Флавоноиды

 

Танниды

Полифенолы

Малина обыкновенная

1

2

 

3

Оранжевое

Ярко-желтое

Бурое

0,72

0,76

 

0,88

Полифенолы

Фенолокислоты

 

Танниды

Вероника длиннолистная

1

2

 

3

Коричневое

Ярко-желтое

Светло-желтое

0,059

0,75

 

0,83

Флавоноиды

Полифенолы

 

Фенолокислоты

Подорожник большой

1

2

Оранжевое

Голубое

0,88

0,83

Полифенолы

Фенолокислоты

БУВ 4:1:3

Кровохлебка лекарственная

3

1

Бурое

0.027

Танниды

Морковь посевная

 

1

2

Желтое

Темно-бурое

0.9

0.89

 

Полифенолы

Танниды

Шалфей лекарственный

 

1

 

2

Темно-оранжевое

Ярко-желтое

0.84

 

0.89

Полифенолы

 

Фенолокислоты

Подорожник большой

 

1

 

2

Светло-желтое

Бурое

0.93

 

0.96

Полифенолы

 

Танниды

Марьянник луговой

 

1

 

2

Светло-коричневое

Бурое

0.95

 

0.98

Флавоноиды

 

Танниды

 

Полученные пятна на хроматограммах позволяют сделать заключение о наличии биологически активных веществ фенольной природы во всех видах исследуемого ЛРС. Интенсивность окраски пятен и площадь позволяет судить об их высокой концентрации. Таким образом, полученные результаты позволяют сделать следующие выводы:

1.  Метод ТСХ пригоден для предварительного качественного и полуколичественного определения содержания БАВ в ЛРС.

2.  Распределение веществ на пластинке “Silufol” идет лучше, чем на пластинках “Sorbfil”, так как длина пластинки увеличивает пробег вещества, и следовательно, обеспечивая более эффективное разделение веществ. Пластинки марки “Silufol” обеспечивают более четкие границы пятен исследуемых веществ.

3.  Для определения флавоноидов и фенолокарбоновых кислот предпочтительнее система БУВ 4:1:5, так как именно эта система обеспечивает оптимальное разделение веществ. Использование системы БУВ 4:1:3 не дает такого эффекта.

 

Список литературы:
1. Гусев Н.Ф. Биологические особенности и перспективы использования растений рода Veronica L. (сем. Scrophulariaceae Juss.) лесостепного и степного Предуралья // автореферат. Докт. дисс. Оренбург. – 2010. – 39 с. 
2. Немерешина О.Н., Гусев Н.Ф., Карпюк М.С. К вопросу активизации клеточной защиты растений под влиянием выбросов предприятий газпрома. // Проблемы анализа риска. 2011. Т. 8. № 4. – С. 36–46.
3. Писарев Д.И. и др. Химическое изучение биологически активных полифенолов некоторых сортов рябины обыкновенной Sorbus aucuparia // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация. – 2010. – Т. 12. – №. 22 (93).
4. Яковлева А.И., Семенова В.В. Биологически активные вещества пижмы обыкновенной Tanacetum vulgare L., произрастающей в Центральной Якутии // Химия растительного сырья. – 2010. – №. 3.