Изучение цитотоксической активности тефэстрола в условиях экспериментального канцерогенеза
Журнал: Научный журнал «Студенческий форум» выпуск №20(20)
Рубрика: Медицина и фармацевтика
Научный журнал «Студенческий форум» выпуск №20(20)
Изучение цитотоксической активности тефэстрола в условиях экспериментального канцерогенеза
Изучение фармакологических свойств ряда индивидуальных сложных эфиратерпеноидных спиртов, выделенных из специфических растений произрастающих в Центральной Азии, способствовало выявлению соединений выраженной эстрогенной активностью [1, 2]. На основе одного из них – ферутинин, выделенного Ferula tenuisekta, обладаюшего выраженным эстрогенным действием, разработан лекарственный препарат - тефэстрол, который разрешен для широкого применения в акушерско-гинекологической практике [3, 4]. Учитывая, что роль эндокринной терапии гормонозависимых опухолей как в сочетании с оперативным вмешательством, так и в случаях консервативной лечении остается актуальной. Было исследовано влияния тефэстрола и в этом направлении. Предполагается, что в отдельных случаях у больных при раке молочной железы (РМЖ) в постменопаузе и у больных, опухолевые клетки которых содержат рецепторы к стероидным гормонам, они способны в отдельных случаях заменить хирургические методы кастрации [5].
Цель исследования - изучить цитотоксический эффект и индукцию апоптоза при действии на опухолевые клетки молочной железы и эндометрия различных доз тефэстрола.
Материал и методы исследования.
Использовались образцы опухолевых тканей полученных из биопсийного и операционного материалов пациентов c верифицированным диагнозом рак молочной железы.
В качестве референс препаратов были использованы доксорубицин (производства EBEWE Pharma) и эстрадиол (производства GedeonRichter).
Цитотоксическую активность препаратов определяли согласно методике [6].
Результаты исследования и их обсуждение. Тефестрол в дозе 500 мкг/8·106 клеток, вызывал высокую цитотоксическую гибель опухолевых клеток молочной железы, полученных из образца опухолевой ткани больной РМЖ на стадии T2N1M0 (табл. 1). Общая гибель клеток равнялась 74%, в том числе индукция апоптоза была 18%. С уменьшением дозы воздействия тефэстрола до 10 мкг/8·106 клеток, уменьшается и его противоопухолевая активность (62%), однако остается высокой апоптозная гибель клеток (10%). В контрольной группе гибель опухолевых клеток составила 2%. Приведенные для сравнения результаты известных противоопухолевых препаратов доксорубицин и эстрадиол, используемых в общепринятой схеме лечения рака молочной железы в оптимальных дозах свидетельствуют о высокой цитотоксической активности доксорубицина при действии на опухолевые клетки, но при этом отмечена самая низкая апоптозная гибель клеток. Эстрадиол вызывал умеренную гибель клеток, которая была на уровне 50%, но индукция апоптоза была высокой (7%).
Исследование воздействия доксорубицина в дозе 10 мкг 8·106 клеток показало, что гибель опухолевых клеток молочной железы составила 95%, апоптоз был обнаружен в 5% клеток. Следовательно, в данном случае клеточная смерть при воздействии доксорубицина происходит по типу некроза, а апоптоз выражен слабо.
Другой образец опухолевой ткани был взят из операционного материала больной с диагнозом рак тела матки T2N1M0 (табл. 2). Целью данного эксперимента было установление цитотоксического эффекта тефэстрола в опухолевых клетках эндометрия, другого генеза отличного от клеток молочной железы.
Были использованы те же дозы тефэстрола и тест-культура опухолевых клеток эндометрия.
В ходе эксперимента было выявлено, что доза 50 мкг/8·106 клеток вызвала самую высокую индукцию апоптоза до 15%, за счет этого и общая гибель опухолевых клеток была достаточно высокой (до 73%).
Таблица 1.
Цитотоксическая активность тефэстрола при воздействии на опухолевые клетки молочной железы T2N1M0 в сравнении с эстрадиолом и доксорубицином
|
Препарат |
Доза воздействия, мкг/млн клеток |
Количество клеток, % (n=100) |
Цитотоксическая активность (суммарно погибшие и апоптоз), % |
||
|
погибших |
живых |
aпоптоз |
|||
|
Тэфастрол |
500 50 10 1 |
56 13 52 8 |
26 76 38 90 |
18 11 10 2 |
74,0+4,4* 24,0+4,3* 62,0±4,9* 10,0±3,0* |
|
Эстрадиол |
1 |
38 |
55 |
7 |
45,0=5,0* |
|
Доксорубицин |
10 |
93 |
4 |
3 |
96,0±1,9* |
|
Контроль |
- |
2 |
98 |
0 |
2,0±1,4* |
* - p<0.05 по сравнению с контролем
Таблица 2.
Цитотоксическая активность тефэстрола при воздействии на опухолевые клетки эндометрия
|
Препарат |
Доза воздействия, мкг/млн клеток |
Количество клеток, % (n=100) |
Цитотоксическая активность (суммарно погибшие и апоптоз), % |
||
|
погибших |
живых |
aпоптоз |
|||
|
Тэфастрол |
500 50 10 1 |
76 58 36 7 |
20 27 58 90 |
4 15 6 3 |
80,0+3,2* 73,0+4,4* 42,0±4,9* 10,0±3,0* |
|
Контроль |
- |
4 |
96 |
0 |
4,0±1,2* |
* - p<0.05 по сравнению с контролем
Заключение. Наибольшую противоопухолевую активность тефэстрол проявил в дозе 500 мкг/8·106 клеток, вызывая общую гибель опухолевых клеток молочной железы при стадии T2N1M0 до 74 %, в том числе индуцируя апоптоз в 18% клеток. При этом, при воздействии тефэстрола на опухолевые клетки, находящихся в эстрогендефицитном состоянии, он, очевидно, взаимодействует с рецепторами, но проявляет слабый эстрогеноподобный эффект.
Представленные экспериментальные данные показывают, что тефэстрол как и другие фитоэстрогены, способен модулировать специфические ответы тканей-мишеней репродуктивных органов и влиять на рецепцию, продукцию и метаболизм эндогенных гормонов, а так же на их действие, на клеточном уровне. Возможно, тефэстрол может обладать способностью мимикрировать или блокировать действие эндогенных эстрогенов. Клетка может ответить на воздействие эстрогенов, если они взаимодействуют со своим рецептором. Рецептор структура димерная и может составлять различные комбинации, которые способны взаимодействовать как с эстрогенами, так и с фитоэстрогенами. Поэтому между ними формируется определенная «конкуренция» за рецепторы.
